第四节 显微授精技术
随着IVF-ET技术不断更新和完善,促进了人类受精过程和胚胎学基础研究的迅猛发展,并带来临床治疗不育症的新突破。经过长期的IVF临床实践发现,各种原因的不孕症中,由男性因素引起的不育的体外受精率是最低的,而且受精率随着精子的质量差而下降。多年来,尽管人们一直试图通过药物或手术来提高精子的质量,但是其效果甚微,几至无效。对于严重的男性不育(如:精子密度<5×106/ml,活动率<40%,畸形精子率>60%)及不明原因的常规IVF反复失败者等,IVF技术已不能完全适应临床需要,从而使精子显微注射技术的发生和发展成为可能和必然的结果。显微授精技术主要包括透明带部分切除(PZD),透明带下授精(SUZl)及卵细胞浆内单精子注射(ICSI)。
一、适应人群
1.严重男性因素所致不孕男方近3年内至少有3次以上****常规检查符合以下标准者:
①严重少精症:一次****的精子密度<2×106/ml。
②弱畸精症:平均精子密度>2×106/ml,精子活动度<25%或精子形态畸形率>25%而<85%者。
③少弱畸精症:平均精子浓度<20×106/ml,同时精子活动度<25%和精子形态畸形率>85%。
④输精管阻塞或先天性输精管缺如所致的无精症患者。
2.多次IVF-ET周期失败的不明原因性不育症尤其是在以往IVF-ET周期中,卵子不受精或受精率低下(<20%)的不育患者。
ICSI的主要禁忌证为染色体异常或严重先天畸形,故所有患者在进行ICSI前必须检查夫妇双方染色体核型及激素水平,均在正常范围者方可进行。
二、基本过程
首先获取精子、卵子后经过处理。
准备显微操作仪与倒置显微镜连接,置于防震台上,在200倍下,先将视野调至中央的精子,选择一条活动的形态正常的精子,将注射针稍微调高后,垂直放于仍在活动的精子尾部的中点,慢慢下压,随即将注射针快速拉过精子尾部,使精子制动。将制动的精子从尾部吸入注射针内。
显微注射用显微固定针固定卵子,将显微注射针与卵子均调节至最清晰状态,使注射针位于卵子的正中部位,卵子的极体位于12或6点位置。将精子推至注射针尖端处,注射针于3点位置垂直穿越透明带及卵子胞浆膜进入胞浆内,回收部分胞浆,然后将回抽的胞浆连同精子一起注入胞浆,最后撤出注射针,把精子留在胞浆内。注射完成后,接下来的程序同常规IVF-ET。