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第49章 49后续操作,你看不看?

接下来咱们就共同唠唠基因工程的第二步。

上回咱们说完了基因工程的第一步,就是目的基因的获取。接下来咱们就唠唠基因工程的第二步,基因表达体的构建。这一部是基因工程的核心,也是基因工程的第二步。

对于基因表达体的构建,我们的目的有两个:

1使目的基因在受体中稳定存在

2使目的基因可以遗传给下一代

这就是基因表达体的构建的目的。

之后,既然谈到了基因表达载体,那么咱们就来看看基因表达体是由什么组成的。

基因表达载体是通过启动子+目的基因+标记基因+终止子组成的。

启动子的实质就是我们前面说的引物,他的目的就是被RNA聚合酶识别,这样就可以在生物体内进行转录和翻译的过程了。从而产生我们所需要的蛋白质,或者是相对的性状。

目的基因实质就是我们需要表达的基因,也就是这个基因表达载体的主体成分。

标记基因就是为了我们后续的鉴别受体细胞中是否含有目的基因的一种相当于荧光标记,可以及时的让我们发现目的基因的存在。

终止子,顾名思义,它的目的就是让转录进行停止,实质就是终止密码子。

这就是基因工程的第二步操作,基因表达载体的构建。

之后咱们就进入基因工程的第三步过程,将目的基因导入受体细胞中。

在此之前,我们要提出一个概念,叫做转化。在基因工程中,我们的特有名词转化指的是目的基因进受体细胞,并在受体细胞内稳定存在与表达的过程,这个过程就叫做转化。

那么我们的转化方法有什么呢?正可谓是:物以类聚,人以类分。

所以我们要根据生物种类的不同而采用不同的转化方法。

对于动物而言,我们需要采用显微注射技术。

什么是显微注射技术呢?所谓显微注射技术,就是指在显微镜下,通过人工方法向动物细胞内进行注射我们的目的基因,也就是基因表达载体。

在这里我们需要使用现代的仪器,显微注射仪将目的基因注入到细胞中,并且还需要将细胞置于子宫内培养,否则它难以形成鲜活的个体。

对于微生物而言,我们通常采用钙离子处理法。

钙离子处理法就是利用了微生物对钙离子吸收这一过程的现象,而采用的一种技术方法。

这种技术方法就是用钙离子处理细胞,让细胞可向细胞内吸收钙离子的状态。

这种状态也叫感受态,这种细胞就叫做感受态细胞。之后我们再向这个溶液中注入DNA分子,让其吸收。

买二赠一,既然说完了基因工程的第二步和第三步操作,那么我们顺便来谈一谈基因工程的最后一步。

基因工程的最后一步也是进工程的第四步(小编比较细心,害怕汉字不认识>_<¦¦¦,其实是按照,特定的叙述方式进行叙述的,请多多见谅!)

基因工程的第四步是:目的基因基因的检测与鉴定。这一步也是很重要的一步,也是非常不可或缺的。

因为它可以检查基因工程是否成功,如果成功,需要记录数据,如果不成功,还需要重新做实验,所以这一步,必不可少。

对于目的基因的检测与鉴定的方法有:DNA分子杂交技术、分子杂交技术、抗原―抗体杂交技术、个体生物学水平鉴定如接种实验等。

在这里,这些杂交技术都是需要进行的,并且是按照这个顺序从上至下依次进行的。每一个技术都是不能缺少的,这是逐步检测DNA是否复制、转录、翻译、表达的流程。

DNA分子杂交技术就是将含目的基因的DNA片段,用同位素标记作为探针,让探针和基因组DNA杂交,如果有杂交带,那么就有目的基因进入染色体当中。反之,则没有。没有,就需要重新做实验。

分子杂交技术是指检测mRNA是否存在目的基因的遗传片段。具体的操作是:在生物体内提取mRNA用已经标记的目的基因,作为探针与mRNA杂交,如果出现杂交带,那么说明有此类mRNA产生。反之,和上述一样。所以就不多说了。

抗原―抗体杂交技术是从受体的生物体中提取蛋白质与相应的抗体结合,如果出现杂交代,那么就会有蛋白质产品的生成。反之,一样。

对于个体生物学水平鉴定,我们就简单的了解最基础的接种实验。

接种实验就是指将生物学与天然生物对比,对其接种改变的性状,观察看看是否此类性状。这就是接种实验。

好了,话不多说了,这就是今天的全部内容,买二赠一,你怎么看?⊙ω⊙

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